外泌体提取试剂盒(组织)

filler

Catalog No. 规格 价格库存数量
I0006-50 50mL ¥3,000
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不可用

详情描述

运输与保存

4℃,保存12个月。

注意事项

1.  使用前请将外泌体抽提试剂充分混匀。

2.  产品只针对组织样本,不适用其它体液或者是细胞培养上清中外泌体的抽提;如果需要进行细胞上清外泌体分离,请选用细胞培养上清外泌体快速抽提试剂盒。

3.  为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作方法

一、     样品预处理

新鲜离体组织块(大小 5mg)用无菌的冰 PBS 清洗,洗去血渍及其他组织液。然后放在 加有 5mL无血清的 RPMI 培养基的培养皿上,用眼科剪把组织块剪成芝麻粒大小的小块,放 37℃培养箱培养 12-24h.用吸管小心吸取培养液,4800g 离心 10min,收集上清,再 4 20000g 离心去掉细胞碎片,用无菌的 EP 管收集上清液(同一标本可以多做几个平行样,然 后统一收集上清液,以提高 exosome 收集量),4℃或-80℃保存。

二、     外泌体分离纯化

1.  取出组织培养的上清液样本,恢复到室温,并 3000gx20min4℃离心,取上清,去除大分子蛋白及组织碎片。

2.  0.22um 滤器过滤。

3.  1ml 样品转移至一个无菌的新的EP管中,加入exosome分离纯化溶液 0.2mL,用移液枪充分混匀,4℃混匀过夜或>14小时。

4.  1500gX30min4℃离心。

5.  吸除上清液后,再 1500gX5min4℃离心,去除残余溶液。

6.  50ul 无菌 PBS 或去离子水重悬混匀 exosome 沉淀。

7.  重悬 exosome4℃可短期保存,-20℃可长期保存。

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