详情描述
组分:M-MuLV反转录酶 (200 U/μl) 50 μl;10× M-MuLV RT 缓冲液1.0 ml。
概述:莫洛尼氏鼠白血病病毒 (M-MuLV) 反转录酶是一种RNA介导的DNA聚合酶。该酶能以RNA (合成cDNA时) 或单链DNA为模板,由引物起始合成一条互补的DNA。M-MuLV反转录酶无3?→5?核酸外切酶活性。
来源:重组E. coli菌株,含有从M-MuLV中克隆的反转录酶基因。
应用:1. cDNA第一链的合成。2. 合成cDNA探针。
存储溶液:20 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25°C),200 mM NaCl,0.1 mM EDTA,1 mM Dithiothreitol (DTT),0.01% NonidetTM P-40 (NP-40) (V/V),50%甘油(V/V)。
反应条件:1×M-MuLV反转录酶反应缓冲液,适量dNTPs (不随酶附赠),37°C或42°C温育。
1×M-MuLV反转录酶反应缓冲液: 50 mM Tris-HCl (pH 8.3, 25°C), 75 mM KCl, 3mM MgCl2, 10 mM DTT。
活性定义:1单位指以poly (rA) 为模板、oligo (dT) 为引物,在37°C条件下,10分钟内催化1 nmol的dTTP 掺入形成酸不溶性沉淀物所需要的酶量。
热失活条件:65°C加热20分钟失活。