详情描述
组分:Quick-Load Taq 2× Master Mix 1.25 ml;25 mM MgCl2 Solution 1.5 ml。
概述:Quick-Load Taq 2× Master Mix是一种经优化的即用型溶液,包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、KCl、示踪染料及稳定剂。本品中含有两种常用于DNA胶的示踪染料,染料橙黄G和二甲苯蓝FF,使预混液呈绿色,PCR产物可直接上样于琼脂糖凝胶。在1× TBE中,以1%的琼脂糖凝胶电泳,染料橙黄G的迁移率约为4 kb,二甲苯蓝FF的迁移率约50 bp,本品中所含的示踪染料不会与DNA条带产生共迁移。Quick-Load Taq 2× Master Mix非常适用于模板为纯化的DNA溶液、细菌克隆和cDNA产物的常规PCR反应,以复杂的基因组DNA为模板可扩增长达4kb的片段,以Lambda DNA为模板则可达到5 kb的长度。Taq DNA聚合酶是一种耐热DNA聚合酶,该酶具有5’→3’聚合酶活性和双链特异性的5’→3’核酸外切酶活性。
来源:来源于一种重组的 E. coli 菌株,该菌株含有来源于Thermus aquaticus YT-1的Taq DNA聚合酶基因。
应用:PCR,引物延伸,微阵列分析,高通量 PCR。
随酶提供的试剂:25 mM MgCl2。
反应条件:25 μl或50 μl反应体系中加入1× Quick-Load Taq Master Mix、DNA模板和引物。
1× Quick-Load Taq Master Mix:10 mM Tris-HCl (pH8.6@25°C),50 mM KCl,1.5 mM MgCl2,50 U/ml Taq DNA 聚合酶,0.2 mM dNTPs (每种),5%甘油,0.08% NP-40,0.05% Tween-20,0.024%染料橙黄G,0.0025%二甲苯蓝FF。
单位定义:1单位指在75°C反应30分钟,能使10 nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物中所需要的酶量。
活性检测条件:1× 标准Taq反应缓冲液,每种dNTP (包括[3H]-dTTP) 各200 μM以及200 μg/ml的活化小牛胸腺DNA。
热失活:无。